黑寡妇蜘蛛有坚硬的外壳，内含几丁质和蛋白质。当雄性成熟，它会编织一张含精液的网，将精子涂在上面，并在触角上沾上精液。黑寡妇蜘蛛繁殖时，雄性将触角插入雌性受精囊孔进行交配。但是，黑寡妇蜘蛛在与配偶的交欢过程中，常把与之交配的雄性蜘蛛杀死，并且吞噬其脑袋。但是，只有雄性蜘蛛被虐杀后，才能完成射精的过程。它们就是通过这种残忍的方式达到性唤起的。不过，在雌性饱食的情况下，雄性偶尔可以逃脱。黑寡妇蜘蛛发育成熟需要2~4个月。雌性在成熟后能继续生存约180天，雄性则只能存活90天了。